空气微生物采样器

    ①滤纸空气微生物采样器。在采样夹里放置定量滤纸或玻璃纤维滤纸等作为滤料。滤  纸是多孑L性的，孑L的结构弯曲。孔径5μm多孔性滤纸空气微生物采样器在收集0.3μm的细  菌微粒时．采样效率不小于95％。
    ②滤膜空气微生物采样器。在采样夹里放置聚碳酸酯核孔薄膜作为滤料。滤膜中孔的  结构是直孔，通常使用的孔径为0.35～0.5 0／μm，孔径大小一致性好。采样效率主要取决于  滤膜孔径大小。孔径为0.60／μm滤膜采样器的采样效率，相当于孔径为5μm滤纸空气采样  器的采样效率。另外，滤膜表面光滑，比滤纸更有利于分析测定。滤膜过滤器收集的霉菌和放线菌的孢子，用电子扫描显微镜计数。
    2．仪器技术指标和要求
    空气采样器的技术指标应符合下列要求：①采样效率应接近l 00％；②空气采样流量：便携式滤膜采样器恒流流量为0.5L／min、1.0L／min、2.0L／mi n；③大流量滤膜式采样器流量1 m³／min；④滤膜孔径：聚碳酸酯核孔薄膜孔径常用0.35～0.50／μm。
    3．采样和测定具体步骤
    (1)安装与消毒  将选择好的滤膜安装在采样夹里，并认真检查安装是否合乎要求，然  后用紫外线(UV)将滤膜和采样夹进行消毒。
    (2)进行采样  过滤式空气采样器的空气采样流量准确程度直接影响采样结果，在采样  前应用皂膜流量计校准采样泵的流量。将采样夹用真空管与便携式恒流采样泵连接，启动采  样泵进行采样。
    (3)细菌培养和计数
    ①直接计数法  采样完毕后，采用非培养方法分析，即样品不经过培养，就鉴别和计  数收集在滤料上的微生物。
    ②细菌培养法  采样完毕后，取下滤膜，直接放在培养基上培养，或者用聚山梨醇酯80溶液将微生物洗脱下来，悬浮于液体中，逐级：进行稀释，接种平板后培养，计数菌落数。
    4．采样结果计算
    (1)采样完毕后，采用非培养法分析；或者将滤膜取下直接放在培养基上培养，计数菌  落数，求出单位体积(m3)空气中的菌落数，以CFU／m³报告测定结果。空气中的菌落数  可用式(6—5)计算：
    C—l000 N/FQt         (6-5)
    式中，C为空气中的菌落数，CFU／m³；N为计数平板上的菌落数。CFU；F为平板或  滤膜分量；Q为采样流量，L／min；t为采样时间，min。
    (2)采样完毕后，用聚山梨醇酯80溶液将滤膜上的微生物洗脱下来，悬浮于液体中，  逐级进行稀释，接种平板后培养，求出单位体积(ITl3)空气中的菌落数，以CFU／m³报告  测定结果。空气中的菌落数可用式(6—6)计算：
    C—1000ƒVN／FQt          (6—6)
    式中，C为空气中的菌落数，CFU／m³；f为溶液稀释因子；V为最终溶液体积，mL；  N为计数平板上的菌落数，CFU；F为平板或滤膜分量；Q为采样流量，L／min；t为采样  时间，min。
    (三)安德森撞击式采样器
    安德森撞击式采样器是一种先进的空气微生物采样仪器，在采样和测定空气微生物浓度方面具有准确性和可靠性。国际微生物会议和美国政府工业卫生学家协会推荐为标准空气微生物采样器，也是应用最广泛的空气微生物采样器。
    1．采样原理和仪器结构
    (1)采样原理  安德森撞击式采样器是利用微粒的惯性撞击作用，直接将空气微生物收集于半固态的营养琼脂表面上，采样后可直接进行培养、计数，测定出每立方米空气中所含的微生物菌落数(CFU／m³)。
    撞击式采样器采集空气中的粒子上携带的活细菌和真菌，在半固态的营养培养基上或者黏附表面上，其理论依据是微粒惯性撞击原理。依据惯性撞击原理收集微粒的采样原理采样时，当微粒随着有一定流速的气流通过圆孔小喷孔后，粒径较大的微粒具有足够大的惯性时，就会做惯性运动，并会离开气流，撞击于琼脂表面上被收集下来；较小的未撞击的微粒，惯性小的就会随着气流(箭头指引的方向)运动被带走，然后进人次一级。
    (2)仪器结构  安德森撞击采样器是一种多孔撞击式空气微生物采样器，在实际空气微生物采样中采用的有：八级安德森撞击采样器、六级安德森撞击采样器、二级安德森撞击采样器和一级安德森撞击采样器，常用的是前三者。
    ①八级安德森撞击采样器。八级安德森撞击采样器是一个多级，多孔的阶式撞击采样器．用于大气中的颗粒物分级采集，分析质量浓度和粒径分布。撞击采样器根据空气动力学原理设计，由8个撞击盘组成，每个撞击盘具有数量和直径经过严格设计的加速喷射小孔。
采样气流经过每一级撞击盘时，其中较大的颗粒由于惯性作用，直接撞击并停留在撞击盘的表面，而较小的颗粒则随空气流穿过，到达下一级撞击盘。不同空气动力学粒径的气溶胶粒子根据空气动力学原理被分离并采集到各级采样膜上，膜片用于重量和颗粒物成分分析。
    ②六级安德森撞击采样器。六级安德森撞击采样器是由六个撞击器组合成一体，每一级实际是一个单级采样器，利用6次反复撞击原理，绝大部分粒子特别是在气管及肺沉降的粒子基本都撞击下来，因而它采集到的粒子大小范围自然比单级的广，这是一些单级撞击采样器所无法比拟的。六级空气微生物采样器模拟人呼吸道的解剖结构和空气动力学生理特征，采样惯性撞击原理而将悬浮在空气中的微生物粒子分等级地收集到采样介质表面上，然后供培养及微生物学分析。六级安德森空气微生物采样器整个仪器是由撞击器、主机(流量计)、定时器、三脚架组成。
    ③二级安德森撞击采样器。二级安德森撞击采样器是改进型采样器，适用于室内外环境空气微生物污染调查研究和例行采样．如医院、生物洁净室和工业中微生物污染的检测和评价。二级安德森撞击采样器依据微粒惯性撞击原理，能够测定出空气中所含的微生物浓度，反映出空气微生物污染水平，又可测出可吸人与非可吸人粒子上携带的微生物浓度，评价其粒度分布状况及潜在的致病危害程度。二级安德森撞击采样器设有空气采样流量自动控制装置。当所用的真空泵的采样负压≥0047 MPa时，采样流量就可达到28.3 L／mi n。不需使用调节阀门和流量计等部件，一般情况下不需要校准，从而提高了采样结果的可靠性。与八级、六级安德森撞击采样器相比，使用平板数量少，结构比较简单。
    ④一级安德森撞击采样器。一级安德森撞击采样器是有400个孔的单级空气采样器，适用于测定每立方米空气中所含的微生物菌落，}基数(C FU／m³)。1987年，在国际生物气溶胶会议上，美国政府工业卫生学家协会(ACGI H)将一级安德森撞击采样器推荐为室内空气微生物采样器。一级安德森撞击采样器没有稳流控制系统，需要使用调节阀门和流量计等部件，调节采样器的空气采样流量达到28.3L／mi n。
    2．仪器检定和校准要求
    一级、六级和八级安德森撞击采样器在用于采样之前，需要使用调节阀门和流量计等部件，调节采样器的空气采样流量达到28.3 L／mi n。为了提高采样结果的可靠性，必须经常使用标准校准装置(干气体流量计)校准空气采样流量。只要采样器的空气采样流量达到28.3 L／mi n，采样器的收集效率就会不小于9 5％。
    二级安德森撞击采样器设有恒流装置，只需要真空泵的采样负压≥0．047 MPa时，采样流量就可达到28.3 L／min。因此，对于二级安德森撞击采样器，需要监控真空泵的采样负压是否符合设计要求。只要负压达到设计要求，采样器的收集效率就会不小于95％。
    3．采样和测定操作步骤
    各种安德森撞击采样器，主要是所使用的营养琼脂平板数量不同，在采样和测定操作步骤上稍有差异。这里仅介绍六级安德森撞击采样器的采样和测定操作步骤，其他的安德森撞击采样器可以参照操作。

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